【泰国代孕简介】

陈琦老师

我是从1962年4月份调到微生物所事情的，本来正在山东大学教书。调我去事情，就是叫我去负担谷氨酸发酵出产的这个课题的。

此刻各人皆晓得味精的次要化学成分是谷氨酸的钠盐。味精最早是日本人创造的，其时叫味之素。上个世纪20年月我国科学家也试制成功，大受欢迎。其时是用从豆粕或小麦面粉中失掉的面筋，经盐酸水解失掉谷氨酸，再转变成钠盐而成的，被定名为味精。新中国建立后，味精成为我国出口的紧张产物。自从日本正在1958年采取细菌发酵出产谷氨酸后，本钱大大降低，由于本来要36吨豆粕或36吨小麦才可以失掉1吨味精，而用发酵法出产，用5吨玉米提取的淀粉便可以出产1吨味精了。正在国际市场上日本便把我国的产物架空出来了，为此，外贸部分要求轻工业部研讨细菌的谷氨酸发酵进而用发酵法出产出味精。

从1958年起头，海内做谷氨酸发酵的曾经很多，据说最早的是北京大学生物系，他们分离出来的菌，编号叫29906，由于发生谷氨酸比力多，便同上海医药工业研究院、我院的上海生化研究所停止协作研讨，最初颁发了研讨文章，可是不做到出产上去。我1962年起头事情的时间，他们曾经颁发了良多文章了。其时另有上海市轻工业研究所发酵研究室（厥后正在1966年更名为上海市工业微生物研究所）、正在北京的轻工部发酵工业研究所等单元也展开这方面的研讨。

正在阿谁时间，该当道中国科学院正在发酵工业方面借该当是很强的，其时我的教员方心芳老师担任这个工作。海内谷氨酸发酵研讨从1958年起头到1962年，有好几年了，希望没有年夜。圆老师道谷氨酸发酵这个事，咱们科学院该当把他拿上去。日本1958年便正式投产了，可咱们到1962年借连出产菌种皆不办理。轻工部有这方面的筹划，但咱们（微生物所）不人做。

我来之前，曾经有两个人正在摸索。一名就是沈明珠，厥后调到农科院来了；另一名就是此刻你们晓得的程光胜。程光胜其时是仅仅摸索一些剖析谷氨酸的方式，次要是用滤纸层析（色谱）停止快捷定性（检测）。我来所时方老师由于心脏病正在阜外医院住院，我来看他。他便道，您该当做（谷氨酸），国度急需这个事。我便负担上去了。

菌种挑选

负担上去之后，我便起头思量我该怎样做。其时海内那么多人做，除后面道的那两个研讨单元中，另有一个天津食物发酵研究所（天津工业微生物所前身）等单元正在做，另有三家味精厂，就是沈阳味精厂、上海天厨味精厂跟天津味精厂，这是其时海内比力年夜的味精厂，皆属于轻工体系的，他们也皆正在做，并且人良多。正在如许的局势下，仍是要负担这个名目，我该当怎样做啊？

其时的轻工部筹划只有能产酸2%，便可以念门径投产，在我看来这个目标并不算很好，外洋到达4%了，而咱们2%就要投产。但是便我一人是搞微生物的，此外两人，他们不是学微生物的。微生物正在自然界中品种有千百万，以是我起首要办理怎么样从自然界中把微生物分离出来。要不然您便会自觉，水中捞月一样。

因而我起首查文献，依据查文献的成果看他们用甚么菌。颠末演绎，晓得发生谷氨酸的细菌正在革兰氏阳性菌跟革兰氏阴性菌两大类中皆有，而起首是革兰氏阳性菌。我捉住那两个特性，也就是说，革兰氏阳性菌、不产芽孢的。我本人要离散这类细菌，就要思量它须要甚么养分，养分太丰硕不可，以是我采取了半分解培养基。由于用半分解培养基，便可以把良多养分要求比力丰硕的细菌消除了，同时也把那些对养分要求比力严厉的菌消除了，如许，我要找的菌种更缩小了规模嘛。由于采取取舍培养基，便取舍培育了得当我要的菌。

正在工业微生物学界，采取取舍培育各人皆可以明白。离散到了菌种，下一步我得念门径检测，它是否是发生谷氨酸，哪个产酸高，哪个产酸低，皆要做化学分析，停止挑选。他们本来做的纸层析，明天点样，来日诰日看成果。但是您挑选菌一会儿做个30、20株菌，便没有必然能很快失掉成果。要念大批天做挑选，便遇到两个问题。一个是培育问题，一个是剖析问题。我到所之后，并不立时做试验，9月份才起头做。阿谁时间沈明珠曾经奔忙了，程光胜是为全室做剖析事情，并不详细列入咱们组的离散事情，那么便剩下我一个人了。这时候分派去了无锡轻工学院结业的一名大学毕业生跟我做，叫张震元，他曾经作古了。借分派了一名技术人员，便有了三个人。

我起首便思量培育方式问题，用斜面培育不可，由于要测定发酵液中谷氨酸的天生，以是得用液体培养基，液体培育就是要通气培育，那么便得用摇瓶。一个摇瓶起码也得装15毫升或20毫升，一架摇床最多能放100个摇瓶，也就是最多一次检测100株离散到的菌种，培育也要好几天，如许大批挑选便遭到影响。以是我改用新的门径，就是用试管去培育。一个试管装2毫升、3毫升便可以了，液面下以是一夜蒸发不干，如许我一次可以培育几百个试管，正在一架摇床上我可以放很多多少试管架，如许咱们的次要事情就是接种了。

要剖析那么多发酵试管怎么办，有产酸的，有不产酸的，有产的多的，有产的少的。以是我想要一种可以大批剖析的方式。由于离散到的那么多菌株，我要的是高产的呀。起首要采用定性，产不产谷氨酸。氨基酸有一个显色反映，就是氨基酸与一种显色剂茚三酮会产生特异的反映，显现蓝色、紫色或许白色。只有颠末培育的接种到试管里的细菌能发生氨基酸，便会有颜色。因而咱们便用毛细管从培育好的发酵液试管中取样，正在一张滤纸上每管滴上一点，分散后也就是一粒花生米那么年夜，接着喷茚三酮显色，因而那些有氨基酸的便显出颜色去了，如许大批不产酸的便镌汰了，借可以依据颜色的深浅用肉眼初步判断发生的量，如许，须要进一步定量分析的便出那么多了。如许便可以留下隐了颜色跟颜色深的那些试管，别的的便送到培育室来洗刷吧，便无论了。

接着是定量，定量的问题又去了。本来用纸层析方式，最少要一夜，今天下午点样，到来日诰日上午才气出成果。我又想到采取滤纸电泳的门径。用电泳的话，两个小时便出成果了。当时我有五、六个电泳槽子。一张滤纸最少可以做20多个样品，由于要定量的并没有良多，两个槽子就够了。如许没有便可以大批镌汰嘛，咱们的挑选事情便大大的放慢了。

为何电泳的服从那么下呢？由于电泳是依据份子的带电性分歧去定性的。氨基酸分三大类：中性氨基酸、碱性氨基酸跟酸性氨基酸。碱性氨基酸就是赖氨酸、精氨酸、组氨酸等，酸性氨基酸就是谷氨酸跟天门冬氨酸两种，其他大部分就是中性氨基酸了。电泳时，中性氨基酸便正在中线上不动，碱性氨基酸便往负极挪动，酸性氨基酸便往正极奔忙。而那两种酸性氨基酸岂但挪动距离有差别，颜色也没有一样，我的印象是谷氨酸显出的颜色偏红一点，很快便可以找出来了。如许又镌汰了一批。然后把挑出来的产酸的试管中的发酵液拿来做定量分析，用尺度曲线肯定培养液内里氨基酸的含量有几。这个电泳方式有益处，比及定量氨基酸身分的时间，便出几个菌了。

我正在几个月以内剖析了上万株菌，每一个菌皆是要颠末培育、显色，最初又用电泳做定性跟定量，那没有便很快了嘛。那是我本人的找到的一种挑选进程。您要离散菌，念没有遗漏是没有能够的，自然界的器材您是不会悉数拿到的，但是您念快，便必需有大批的挑选，可能把您要的抓得手，从大批天的工具中挑选，最初剩下很少了，您才简单抓到。

我从1962年9月当前起头做实验，到1963年的3月份我便拿到菌了，其时这株菌的编号是L5-18，就是厥后咱们那株闻名全国的北京棒杆菌AS1.299，它是咱们正在北京郊区清河采样分离出来的。这株细菌正在摇瓶发酵试验中发生的谷氨酸可以到达3%以上，而轻工业部其时筹划只有到达2%便可以思量投产。其时咱们正在几个月中挑选的菌株，最少上万，到最初皆出处所放了，皆不要了。研讨事情不本人的门径，通例做，不会有甚么新发明。旁人做过的不算您的，人家是人家的事。

失掉高产菌株后便停止摇瓶的发酵前提试验。到1964年5月份之前，发酵前提实验便实现了，便可以做中试之前的筹备，可以上中试了。经由过程发酵前提实验，这株菌最高的产酸量可以到达4%到4.5%，糖转化率可以到达40%以上，也就是正在这个时间曾经跨越或到达日本的出产程度了。从1962年9月份起头试验事情，到1963年3月份拿到高产菌，到1964年实验室的事情实现了，总结报告便写出来了。

正好这个时间，1964月的6月，咱们收到上海寄来的谷氨酸发酵中试鉴定会邀请函，要我所派人参加他的会，咱们皆是偕行嘛，他做成了，中试范围是5吨发酵罐。他们所用的菌种是轻工部体系经由过程上海的天厨味精厂从香港买来的，菌号是617号，是一株黄色短杆菌。这株菌甚么时间出去的我没有晓得。我来列入了阿谁鉴定会，当然他们做的挺好的，产酸程度差不多，日本也便这个程度嘛。其时北大跟上海医工院曾经没有做出产研讨了，我的事情他们当然没有晓得，其时出时机交换。鉴定会开完后，便道要出席会议的各个单位职员开个交流会。

正在会上我便提出，可以把咱们的事情给各人讲一讲，他们迎接。我便把咱们的事情讲述了，先容了咱们这株菌的产酸发酵前提。成果会上便颤动了。为何呢？那株617号菌有一个很紧张的问题，就是正在发酵培育进程中要增添尿素，谷氨酸的阿谁氨基便是从尿素去的，但是正在培育中尿素一次加多了，浓度下了阿谁菌便不长，以是必需待耗损到必然水平后再补加，这个工艺正在发酵工业上叫做流加，就是分很屡次增添。要正在发酵进程傍边，每隔几个小时减一次，那便很烦琐了。另有一个缺陷是简单传染杂菌，传染了，发酵没有便完蛋了吗？我便讲我的菌不是这个工艺，跟你们没有一样。我的菌是不要流加，一次把尿素加足，2%就好了，而他们那株菌尿素到达2%便不长了。我的菌加2%尿素产酸这么下，就是很大的特色啊，各人便颤动了。

中试生产

杭州有一个食粮化工厂其时也列入他们的事情，他们阿谁试验步队人良多，号称是一百零八将。他们念办理谷氨酸发酵出产的事，但是并出办理了。杭州阿谁厂的人听过我的先容后便要求立时跟咱们协作，我道可以啊，他们立时便派人跟我返回北京去。他们正在我实验室里有两个人，一个技巧科长，一个技术员，来学方式。学完当前，便归去接着谋划实验室，谋划发酵罐，便干起来了。杭州食粮化工厂厥后叫味精厂，这个厂原来也做味精，但没有叫味精厂，他是食粮体系的。他们晓得咱们的菌种后，便看好了。由于用这个菌不得了，没有简单传染，工艺也出那么庞大，便上马了。这个时间，他们谋划实验室，我回来得进一步做我的事情，为中试做筹备事情。到那年的10月份到11月份，圆老师派我到上海生化所去随着周光宇学习谷氨酸代谢，由于他曾经正在做这方面的事情，圆老师也正视实际学习。但是周光宇是民主人士，他正好列入学习来了，一时不克不及回实验室，我便跑到杭州来了。到了杭州我跟他们一块树立实验室，做摇瓶实验。到了春节，实验室树立好了，实验室的事情也做好了，50立升发酵小罐也破起来了。春节我便不回来，留在杭州了，过春节三天假，也出工夫逛西湖。接着便上罐，接连上了三小罐，依照我摇瓶的前提一次增添尿素，始终到发酵完毕，约莫30到40多个小时，谷氨酸的产量便到了4.0%以上，到达咱们道的目标了。他们其时便道咱们中国本人的菌种能“吃大苦，耐大劳，没有娇气”。我便留在那里，三次50立升小罐胜利了，立时便做500立升罐。到3月初，500立升罐上了十几罐也经由过程了，1965年3月20号摆布便开技巧鉴定会了。那是多快，1962年，我正式试验事情是9月份，到1965年也就是2年多一点工夫，便把中试干完了。

工业化生产

做中试时代，借出做判定的时间，我正在杭州住着。阿谁时间除上海天厨味精厂，另有南通味精厂，姑苏味精厂，常州味精厂，南京味精厂另有很多多少江苏，浙江一些小味精厂，皆到了杭州来学习了。那时间跟此刻没有一样，咱们阿谁年月是为人民效劳，不是为本人效劳，也不要钱，就是自动把技巧送上门来，有时机正在那里学习。到5、6月份5000立升罐（5吨罐）曾经过关了，过关当前一些小味精厂皆归去了，各人归去皆本人也仿照杭州做一个5吨罐便上去了，1965年下半年便很多多少小厂便起来了，很快的。到了1965年的10月份之后，杭州味精厂便做了30000立升罐（30吨罐）试生产，是其时海内最大的正运转的出产罐，该当是颇具出产范围了。

其时没有叫竞争，叫比赛。阿谁时间轻工体系的三个大厂依据他们1964年判定的成果都造50吨大罐，皆正在那里建大厂，他们认为第一次1964年便中试胜利了，5吨罐皆可以出产了。但是到1965年，不到一年杭州便上了30吨罐，可是上海天厨味精厂、沈阳味精厂、天津味精厂的50吨罐都还没做出来呢，真正大规模投产借正在杭州厂，仍是咱们的菌。天津味精厂其时便跟咱们协作了，天津有一个天津食物发酵研究所，天津味精厂来找他们，也找咱们，咱们便把菌给他们了，我时常来，便晓得他们做这个事。天津50000立升罐是1966年4月份投产，用咱们菌投产，本来阿谁617号菌便不消了。到了1966年4月份，4月份那时间借出文化大革命，文化大革命是下半年的事，6月份当前，上海天厨味精厂、沈阳味精厂也离别投产他们的50吨罐了。但是沈阳味精厂用了他的菌，接连倒了18罐， 18罐皆是被传染了。我下面道过，用他们的菌种，培养基中尿素浓度耐不住那么下，要流加尿素，简单染菌。上海天厨味精厂也产生过倒罐，他能够好一点，由于技巧是从他那里先起头的。可是这个时间，文化大革命曾经起头了，那工人老大哥位置进步了，他们道，海内的菌那么好，干嘛不消呢？便造反了。这一造反了，也便换咱们的菌了。沈阳味精厂换了咱们的菌，天津味精厂早就用了。从1966年的下半年最大规模的厂皆换了咱们的菌。

菌种判定

咱们的菌其时用的是离散菌号，由于这个菌要正式对外，便把原始的离散号L5-18，便改成正式的收藏号AS1.299，AS1.299那时间便正在天下立名了，味精界皆晓得这个菌了。这个时间我便起头做这个菌的判定了，事实是一个甚么菌呢。这个菌我是从北京清河粉丝厂分离出来的。颠末判定，是革兰氏阳性无芽孢菌，可是我发明它有一个特色，它内里不是典范的球菌，细胞内里有异染颗粒，异染颗粒正在细菌内里该当是属于棒状杆菌类，由于我是弄微生物的，对微生物仍是比力熟习。这个菌从北京分离出来，颠末培育判定，该当属于棒状杆菌，那是属名，种名便叫北京棒状杆菌，正式定了这个种名，由于其时也愿望海内可能有本人的技巧。正式定了名，我也发表文章了。实在在我看来，日本人基础没有懂微生物，我一看他的文章，晓得他也是属于棒状杆菌，但他为了突出本人，去一个短杆菌，阳性菌，无芽孢。他不把异染颗粒给捉住。木下祝郎是第一发明人，便定名为谷氨酸小球菌，实在基础便不是小球菌，当前他也改了，叫做谷氨酸棒状杆菌。这类细菌的分类位置是我先发明的，他们厥后发明大概是附近的也便改了。厥后我也便无论阿谁事了，专门停止发酵出产的大面积推广了。

谷氨酸发酵正在文化大革命傍边起头大批投产了，这个时间正在发酵进程中呈现了噬菌体，1967年的上半年，咱们所内里搞噬菌体的研究组便进驻了天津味精厂去采样，离散到了抗噬菌体的菌株。咱们所另有其他很多多少人也到天津味精厂下厂，列入谷氨酸的事情。

1965年，AS1.299菌投产后，咱们又派人出差来广州，依照我的方式，离散到第二株菌，该菌株厥后命名钝齿棒状杆菌，编号AS1.542，这株菌也有他的特色。杭州厂曾去人到咱们实验室列入过该菌的小试事情，同意他们带回作为备用菌。厥后经中试后，该菌也推广应用于出产了。另有一株编号是AS1.545的，也是广州离散到的，但厥后不推广。

那时间也不报奖的设法主意，只是念甚么呢？那时间我便只一个设法主意，有饭吃，有活干，有处所住便可以了，别的便无论了，为人民效劳嘛。阿谁时间为何谷氨酸的发酵出产是一个年夜问题呢？由于其时老法出产味精用的食粮其实太多了，做一吨味精须要36吨年夜豆饼，36吨小麦，但是要是用咱们这个发酵的门径，只用5吨老玉米就够了。阿谁年月，食粮那么缺乏，如许得省几食粮啊。其时用面筋制取味精，天下有两十几家味精厂，整年的味精产量不到5000吨，采取咱们这个菌当前，正在两三年以内，一会儿产量便到达10万多吨了，味精厂从20多家开展到上百家了，两年当前便有200多家了，那便开展很快了。此刻味精到了100万吨了，世界第一了，世界上不其它国度做味精了，皆是中国人做了。

（作者：微生物所“脚印”事情小组）

指点定见：拟好，早期3个月和前期3个月是相对制止做爱的。由于这个期间做爱简单形成流产或早产。当然怀孕中期也最好尽量避免同房，可是并没有制止，不外工夫不宜太长 次数也不宜过频。